第三代PCR技術(shù)——數(shù)字PCR技術(shù)簡(jiǎn)介

? ? ? ?數(shù)字PCR技術(shù)是繼一代普通PCR、二代熒光定量PCR之后的第三代PCR技術(shù)。該技術(shù)將一個(gè)樣本分成幾到幾十萬(wàn)份，分配到不同的反應(yīng)單元，每個(gè)單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的目標(biāo)分子( DNA 模板) ，在每個(gè)反應(yīng)單元中分別對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增；擴(kuò)增結(jié)束后，將有熒光信號(hào)的微滴判讀為1，沒(méi)有熒光信號(hào)的微滴判讀為0，最終根據(jù)泊松分布原理以及陽(yáng)性微滴的比例，計(jì)算出待檢靶分子的濃度或拷貝數(shù)。

? ? ? ?數(shù)字PCR 是一種全新的絕對(duì)定量方式，與傳統(tǒng)定量 PCR 相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：

? ? ? ?絕對(duì)定量：不再依賴(lài)于 Ct 值和標(biāo)準(zhǔn)曲線，直接給出靶序列的起始濃度，實(shí)現(xiàn)真正意義上的絕對(duì)定量。

? ? ? ?更高靈敏度與特異性：數(shù)字PCR可實(shí)現(xiàn)萬(wàn)分之一稀有樣本的絕對(duì)定量，可用于極微量核酸樣本檢測(cè)、復(fù)雜背景下的稀有突變檢測(cè)、表達(dá)量微小差異鑒定、單細(xì)胞基因表達(dá)等方面。

? ? ? ?數(shù)字PCR在分子診斷領(lǐng)域?qū)?huì)發(fā)揮巨大的作用，數(shù)字 PCR 適用于腫瘤生物標(biāo)志物研究、拷貝數(shù)變異分析、微生物檢測(cè)、轉(zhuǎn)基因生物檢測(cè)、mRNA和miRNA檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究等，并對(duì)遺傳病、癌癥、產(chǎn)前診斷的研究提供了一種全新的技術(shù)思路與手段，具有廣泛的、不可替代的應(yīng)用前景。

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銳訊DropX-2000平臺(tái)特點(diǎn)

四通道檢測(cè)：FAM/HEX VIC/CY5//ROX 四色熒光檢測(cè)，提升數(shù)字PCR系統(tǒng)對(duì)多重PCR的包容性；

一體化芯片設(shè)計(jì)：可快速生成20,000~30,000個(gè)均勻微滴，液滴均一穩(wěn)定、尺寸均一；全封閉體系，避免交叉污染。

數(shù)據(jù)質(zhì)控及回溯：支持圖像回溯及樣本一周內(nèi)復(fù)測(cè)。

兼 容 染 料 法 和 探 針 法 及 其 他 類(lèi) 似 原 理 熒 光 方 法

銳訊數(shù)字PCR服務(wù)項(xiàng)目：

DNA樣品：純度OD260/280比值為1.6-1.8，濃度≥10 ng/μl，體積≥10μl。需要冰袋運(yùn)輸。

RNA樣品：純度OD260/280比值為1.8-2.0，濃度≥20 ng/μl，體積≥20μl。需要干冰運(yùn)輸。

暫不接受樣本：

全血、尿液、糞便等。

交付報(bào)告：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：包括實(shí)驗(yàn)方法、步驟、所用試劑、儀器型號(hào)及相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。